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La resistencia al amitraz podría no estar relacionada con una simple mutación

Tabla de contenidos

En este estudio, se recolectaron varroas de colmenares franceses en 2020 y 2021 para evaluar su sensibilidad al amitraz en el laboratorio (CL90; concentración letal para el 90% de la población estudiada). En una segunda etapa, se genotiparon 240 de estas varroas para identificar si la mutación en la posición 260 del gen ORβ-2R-L (previamente relacionada con la resistencia al amitraz) estaba presente o no. Finalmente, se aplicó un medicamento a base de amitraz en las colmenas  donde se habían recolectado los varroas, para medir la eficacia del tratamiento.

Los resultados revelaron áreas locales de resistencia al amitraz, con una disminución menos severa de la eficacia del tratamiento en comparación con otros medicamentos. Además, el análisis genético mostró que la mutación previamente identificada en la posición 260 podría no causar directamente la resistencia al amitraz, cuestionando el papel de este marcador genético y sugiriendo un mecanismo de resistencia más complejo.

El estudio completo (en inglés) puede consultarse en este enlace.

Nota: La publicación menciona el término « polimorfismo nucleotídico (PN) » que es una pequeña variación genética que ocurre cuando un solo nucleótido (los componentes básicos del ADN) en la secuencia del genoma se altera. Sin embargo, como este término puede no ser familiar para todos, lo hemos reemplazado a veces con la palabra « mutación » en el siguiente artículo, un término frecuentemente utilizado en las publicaciones recientes sobre resistencia. Sin embargo, es importante tener en cuenta que, científicamente hablando, un PN se describe más precisamente como una « variación » que como una verdadera mutación.

Introducción

Este estudio examinó la aparición de resistencia al amitraz en las poblaciones de ácaros Varroa destructor en diferentes regiones de Francia. El amitraz, un acaricida formamidina ampliamente utilizado, ha sido un pilar en el control del varroa. Sin embargo, informes recientes, que indican una disminución en la eficacia de los tratamientos, han generado preocupaciones sobre el desarrollo de la resistencia.

A diferencia de la propagación rápida de la resistencia a los piretroides (tau-fluvalinato y flumetrina), la resistencia al amitraz parece aparecer en forma de «islas de resistencia» con disminuciones de eficacia inicialmente menos severas.

Material y método

En 2020 y 2021, se realizaron pruebas de laboratorio para evaluar la sensibilidad de los ácaros varroa al amitraz utilizando varroas recolectadas en colmenares de apicultores profesionales en Francia.

Doscientas cuarenta varroas, clasificadas como «sensibles» o «resistentes», fueron genotipadas, enfocándose en la búsqueda de un  polimorfismo nucleotídico (PN) en la posición 260 del gen Orβ-2R-L (receptor de octopamina), previamente relacionado con la resistencia al amitraz. Además, se realizó un ensayo de campo para evaluar la eficacia de un medicamento a base de amitraz.

En resumen, el estudio se llevó a cabo en 3 etapas, realizadas sobre las mismas poblaciones de ácaros:

  • Prueba de sensibilidad en laboratorio:

Los ácaros varroa fueron expuestos a una concentración letal de amitraz (CL90; concentración letal para el 90% de la población estudiada) en cápsulas de parafina, según un procedimiento estandarizado. Se midió la tasa de mortalidad de las varroas para indicar la sensibilidad. Las poblaciones fueron clasificadas como «sensibles», «intermedias» y «resistentes».

  • Genotipado del gen Orβ-2R-L y posibles vínculos con la resistencia al amitraz:

Estas poblaciones de varroas clasificadas fueron luego genotipadas (se descompone el genoma para comparar los diferentes genes con una población de referencia), enfocándose en el PN (polimorfismo nucleotídico) en la posición 260 del gen Orβ-2R-L, que codifica para el receptor de octopamina de tipo β-adrenérgico, el principal objetivo del amitraz. Este PN provoca una sustitución del aminoácido (N87S) que podría modificar la unión del amitraz.

  • Eficacia en campo de un medicamento a base de amitraz:
La eficacia del medicamento se evaluó en 50 colonias (previamente muestreadas para las pruebas de laboratorio y el genotipado) en dos regiones de Francia (Occitania y PACA) con un tratamiento aplicado a finales de agosto/mediados de septiembre de 2021.

Resultados

Los resultados confirman la presencia de « islas de resistencia » al amitraz, con una disminución de la eficacia menos severa en comparación con los piretroides. Sin embargo, el análisis genético plantea dudas sobre el papel directo de la mutación en la posición 260 en la resistencia. De hecho, esta mutación estaba presente tanto en las poblaciones de ácaros «resistentes» como «sensibles». En otras palabras, esta mutación se encontró tanto en los ácaros muertos tras la exposición al amitraz (= sensibles) como en los ácaros que sobrevivieron a la exposición al amitraz (= resistentes). Esto significa que la presencia de esta mutación no es completamente responsable del desarrollo de la resistencia al amitraz.

En cuanto a la eficacia en campo, la eficacia promedio fue del 93%, con una eficacia del 95,5% en la región de Occitania y del 90,5% en la región de PACA.

Discusión

Aunque la resistencia al amitraz está confirmada en algunas poblaciones de ácaros varroa en Francia, su propagación y su impacto difieren significativamente de la proliferación rápida de la resistencia a los piretroides.

Los resultados de este estudio cuestionan la hipótesis de que la mutación en la posición 260 del gen Orβ-2R-L sea la única causa directa de la resistencia al amitraz. Esto contrasta con los resultados anteriores de Hernández-Rodríguez y col. (2021) y Rinkevich y col. (2023), quienes identificaron esta mutación como un marcador genético clave para la resistencia. Rinkevich y col. habían observado una fuerte correlación entre la presencia de la mutación 260 y la supervivencia de las varroas después de la exposición al amitraz en las poblaciones estadounidenses. De manera similar, González-Cabrera y col. habían vinculado esta mutación a la resistencia en las poblaciones de varroa en España.

El presente estudio no estableció un vínculo directo entre la mutación 260 y la supervivencia al amitraz, lo que sugiere que otros factores y mecanismos más complejos están involucrados en el desarrollo de la resistencia.

Se identificaron variaciones adicionales en las posiciones 344-345 del gen Orβ-2R-L, más frecuentes en las varroas «resistentes», indicando un papel potencial en la resistencia que requiere una exploración más profunda.

Los resultados sugieren que el genoma de las varroas es más variable de lo que se suponía inicialmente, con adaptaciones continuas al huésped y al medio ambiente, incluida la exposición a pesticidas. Por lo tanto, la resistencia al amitraz parece involucrar mecanismos evolutivos complejos en lugar de ser desencadenada por un solo polimorfismo (una sola variación).

Los autores sugieren que la mutación previamente identificada en la posición 260 no es la única responsable de la resistencia al amitraz, que probablemente resulta de variaciones genéticas adicionales y procesos evolutivos. Esta complejidad hace que la detección de la resistencia mediante marcadores genéticos sea más difícil que la simple identificación de la presencia de una única variación.

Puntos Clave

  • Se identificaron regiones locales de resistencia al amitraz en las poblaciones de ácaros varroa en Francia.
  • La reducción en la eficacia del tratamiento con amitraz fue menos severa en comparación con la resistencia a otros pesticidas como los piretroides.
  • El análisis genético cuestionó la idea de que la mutación previamente identificada (o PN) en la posición 260 sea la causa directa de la resistencia al amitraz, lo que indica un mecanismo de resistencia más complejo.

References

  • Marsky U, Rognon B, Douablin A, Viry A, Rodríguez Ramos M.A, Hammaidi A. Amitraz Resistance in French Varroa Mite Populations—More Complex Than a Single-Nucleotide Polymorphism. Insects 2024, 15, 390. https://doi.org/10.3390/insects1506039

  • Hernández-Rodríguez CS, Moreno-Martí S, Almecija G, Christmon K, Johnson JD, Ventelon M et al., Resistance to amitraz in the parasitic honey bee mite varroa destructor is associated with mutations in the β-adrenergic-like octopamine receptor. J Pest Sci 95:1179-1195 (2021).

  • Rinkevich FD, Moreno-Martí S, Hernández-Rodríguez CS, González-Cabrera J. Confirmation of the Y215H mutation in the β2 -octopamine receptor in Varroa destructor is associated with contemporary cases of amitraz resistance in the United States. Pest Manag Sci. 2023 Aug;79(8):2840-2845. doi: 10.1002/ps.7461. Epub 2023 Apr 11. PMID: 36947601.
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